1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯I10min-二甲苯Ⅱ10min-二甲苯Ⅲ10min无水乙醇I5min-无水乙醇Ⅱ5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-50%酒精5min蒸馏水洗。
2、破膜:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止液体流走)，在圈内滴加蛋白酶K工作液覆盖组织，37度温箱孵育15-30min.将玻片置干PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min，切片稍甩干后在圈内滴加破膜工作液爱盖组织，常温下孵育20min，将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
3、配制TUNEL:按片子数量和组织大小取Tunel试剂盒内适量试剂1(TdT)和试剂2(dUTP)按1:9混合，避光待用。
4、孵育:将配制好的TUNEL加到圈内爱盖组织，切片平放于湿盒内，37℃恒温箱孵育2小时，湿盒内加少量水保持湿度。
5、DAPI复染细胞核:切片用PBS(PH7.4)洗涤3次，每次5min，去除PBS后在圈内滴加DAPI染液，避光室温孵育10min.
6.封片:玻片罟干PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍用干后用抗荧光淬灭封片剂封片.
7、镜检拍照:切片于荧光显微镜下观察并采集图像。(DAPI紫外激发波长330-380nm，发射波长420nm，发蓝光;FITC激发波长465-495nm，发射波长515-555 nm，发绿光:CY3激发波长510-560，发射波长590nm，发红光。)
石蜡切片荧光TUNEL结果判读
DAPI染出来的细胞核在紫外的激发下为蓝色，Roche试剂盒为FITC荧光素标记，阳性凋亡细胞核为绿色
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